来源：核酸自动化提取磁珠残留抑制（DNA Lab Space 实验教程）| 编译：DNA Lab Space
提取仪跑完，上清看着清亮，qPCR却整体晚3-5个Ct，复孔之间还跳。换试剂盒、换引物，问题照旧。别急着怪酶。八成是磁珠或洗液残留跟着核酸进了扩增体系。磁珠本身吸附Taq聚合酶，乙醇和胍盐直接压住反应。这篇按流程拆开讲，从裂解结合、磁分离、洗涤、干燥到洗脱和下游加样，一步一个动作。照着做，能定位到具体是哪一步漏了。
第一步：先排除4个低级错误
1. 磁吸时间不够就吸上清。 仪器默认30 s，很多板子根本吸不干净。改到2-3 min，或把程序里磁吸延时拉到180 s。
2. 洗涤后没干燥直接洗脱。 70%乙醇残留5 µL就能让Ct晚2个循环。干燥步骤给65°C 5 min，别省。
3. 磁珠悬液没混匀就分装。 磁珠沉降快，30 s就分层。用前涡旋30 s，或仪器振荡2000 rpm 2 min。
4. **洗脱体积低于50 µL